Инструкция по приготовлению раствора фермента

Версия: v1.0

1. Цель

Определить стандартизированный метод приготовления раствора ферментного реагента, обеспечивающий активность, стабильность и точность дозирования для тест-полосок на глюкозу.

2. Область применения

Применяется к персоналу лаборатории GDHFAD Enzyme Laboratory, готовящему производственные партии фермента.

3. Ответственность

• Лаборант: Выполняет приготовление, записывает данные.
• QA: Просматривает запись партии, выпускает партию.
• Руководитель: Обеспечивает обучение и обработку отклонений.

4. Безопасность

• СИЗ: Лабораторный халат, перчатки из нитрила, защитные очки.
• Разлив: Впитать инертным материалом, утилизировать как химические отходы.
• Биологическая опасность: Если фермент биологического происхождения, следовать руководствам по биобезопасности уровня.

5. Материалы и оборудование

Предмет	Спецификация	Назначение
Порошок фермента	Одобренная партия (сертификат активности)	Активный компонент
Компоненты буфера	Аналитический класс	Контроль pH
Стабилизаторы (например, BSA / полимер)	Указанная чистота	Стабильность
Консервант (если используется)	Соответствует формуле	Микробный контроль
Микропипетки	Калиброванные	Точная измерение
Аналитические весы	0.1 мг	Взвешивание
pH-метр	Калиброванный ±0.01	Корректировка pH
Магнитная мешалка	Переменная скорость	Растворение
Холодильное хранение	2–8°C	Временное хранение
Фильтрационная установка	0.22 µm	Стерильная кларификация
Набор для анализа активности	Валидированный	Проверка активности

6. Формула (Шаблон примера)

Компонент	Целевая концентрация	Допуск	Примечания
Фермент	X U/mL	±5%	Определить на основе отклика полоски
Буфер (например, Фосфат pH 7.0)	50 mM	±2%	Ионная сила
Стабилизатор A	0.5% w/v	±0.05%	Белок/полисахарид
Консервант	0.05%	±0.005%	Опционально
DI Вода	QS до объема	N/A	18 MΩ·cm

7. Процедура

1. Проверка приготовления: Проверить статус калибровки весов, pH-метра, пипеток.
2. Чистота: Протереть стол 70% IPA; собрать стерильные контейнеры.
3. Взвешивание компонентов: Записать каждый вес непосредственно в запись партии (без последующей транскрибации).
4. Растворение: Добавить соли буфера к ~80% конечного объема воды; перемешать до растворения.
5. Корректировка pH: Измерить; скорректировать 1M кислотой/основой до цели (например, 7.0 ±0.05).
6. Добавление стабилизаторов: Медленно посыпать, чтобы избежать комков; полностью растворить.
7. Добавление фермента: Осторожно добавить; избегать пенообразования. Минимальное перемешивание.
8. Доводка объема: Добавить DI воду до конечного объема.
9. Фильтрация (если требуется): Пропустить через 0.22 µm PES фильтр в стерильный янтарный флакон.
10. Гомогенизация: Перевернуть 5 раз—избегать вихря.
11. Отбор проб: Взять аликвоты для анализа активности, pH, вязкости (если применимо), внешнего вида.
12. Маркировка: Нанести этикетку партии (Формат: ENZ-YYYYMMDD-XX). Включить условие хранения.
13. Хранение: 2–8°C (записать время размещения). Поддерживать журнал температуры.
14. Документация: Завершить запись партии; прикрепить результаты тестов.

8. Критерии приемки

Тест	Требование	Метод	Действие при OOS
Активность	В пределах цели ±5%	Валидированный анализ	Переработка или отклонение
pH	Цель ±0.05	Калиброванный pH-метр	Скорректировать, если возможно
Внешний вид	Чистый / легкая опалесценция	Визуально	Исследовать частицы
Микробный (если требуется)	< указанного CFU	Подсчет колоний	Отклонение

9. Запись выхода и потерь

Записать теоретический vs фактический объем; исследовать >2% потери.

10. Отклонения

Записать любое отклонение шага; назначить ID отклонения; QA распоряжается перед использованием.

11. Записи

• Запись партии фермента (этот номер SOP указан)
• Отчет анализа активности
• Журнал pH и калибровки моментальный снимок

12. Контроль изменений

Изменение формулы или метода требует протокола валидации и утверждения QA до выпуска ревизии.

13. Приложения

A. Шаблон полей записи партии примера: - ID партии, партии компонентов, веса, корректировки pH (объемы), ID фильтра, результаты анализа, подпись выпуска.

---

История изменений: v1.0 — первоначальный выпуск.